อุปกรณ์แบบกระดาษสำหรับวิเคราะห์แอลกอฮอล์โดยอาศัยการตรวจวัดทางเอนไซม์

Abstract

            งานวิจัยนี้พัฒนาวิธีการวิเคราะหแอลกอฮอลโดยใชอุปกรณตรวจวัดของไหลจุลภาคแบบกระดาษที่ทํางานรวมกับเอนไซมออกซิเดสและเอนไซมฮอรสราดิสเปอรออกซิเดส โดยมี 3,3′,5,5′-เตตระเมทิลเบนซิดิน เปนซับสเตรทที่เปลี่ยนสีจากไมมีสีเปนสีเขียวปนน้ำเงิน สามารถตรวจวัดความเข้มสีบนอุปกรณแบบกระดาษดวยโปรแกรมประมวลผลภาพ จากการวิเคราะห์ เอทานอลดวยสภาวะที่เหมาะสมพบวาใหกราฟมาตรฐานเปนเสนตรงในชวงความเขมขน 50-1000 M ขีดจํากัดการตรวจวัดเทากับ 1.50 μM และมีความสามารถการทําซ้ำที่ความเขมขน 100,500 และ 1000 μM ที่มีรอยละสวนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์เทากับ 1.93, 1.66, 1.24 ตามลําดับ (n=10) จากผลการทดลองเบื้องตนชี้ใหเห็นวาอุปกรณตรวจวัดที่พัฒนาขึ้นมีแนวโนมสามารถใชหาปริมาณแอลกอฮอลที่ความเขมขนต่ำ มีราคาถูกและเหมาะสําหรับการตรวจวัดภาคสนาม            This research has developed a method for alcohol analysis using a micro fluidic paper based analytical device (μPAD) with enzymatic assay using peroxidase in a presence of 3,3′,5,5′-tetramethylbenzidine as a substrate dye with color changing from colorless to greenish blue. The color intensity was analyzed using an imaging software. Using optimal condition to study method performance, the ethanol standard curve was linear in the concentration range of 50-1000 μM with a limit of detection of 1.50 μM. High reproducibility at concentrations of 100, 500 and 1000 μM was observed with % RSD of 1.93, 1.66, and 1.24, respectively (n=10). As indicated by the preliminary results, the developed μPAD assay is promising to be used for alcohol analysis at low concentration level with inexpensive analysis cost and suitable for field-testing.