การพัฒนาไบโอเซนเซอร์สาหรับวิเคราะห์หาปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์โดยตรึง ฮอสราดิช เปอร์ออกซิ เดสบนพอลิไพโรล และอนุภาคนาโนทอง

Abstract

          งานวิจัยนี้เป็นการพัฒนาไบโอเซนเซอร์โดยใช้ฮอสราดิช เปอร์ออกซิเดสตรึงบนพอลิไพโรล และอนุภาคนาโนทอง บนขั้วไฟฟ้า สาหรับวิเคราะห์หาปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ โดยศึกษาหาสภาวะที่เหมาะสมที่มีผลต่อประสิทธิภาพ ของไบโอเซนเซอร์ ได้แก่ เวลาในการเกิดอิเล็กโตรพอลิเมอร์ไรเซซันของพอลิไพโรล ความเข้มข้นของไพโรล ปริมาณอนุภาค นาโนทอง ศักย์ไฟฟ้า ความเข้มข้นและพีเอชของสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ผลการทดลองพบว่าสภาวะที่เหมาะสมคือ ใช้เวลา 40 วินาที ในการเกิดอิเล็กโตรพอลิเมอร์ไรเซซันของพอลิไพโรล ใช้ไพโรลความเข้มข้น 0.1 M ปริมาณอนุภาคนาโนทอง 500 μL โดยให้ศักย์ไฟฟ้า -0.15 โวลต์ และใช้สารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ความเข้มข้น 0.1 M พีเอช 6.00 และพบว่าวิธีที่ได้ พัฒนาขึ้นมาสามารถตรวจหาปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในช่วงความเข้มข้น 0.1-0.9 mM มีขีดจากัดการตรวจวัดโดย ประเมินจากความเข้มข้นของสารที่ให้สัญญาณเป็น 3 เท่าของสัญญาณรบกวน มีค่าเท่ากับ 0.02 mM และใช้เวลาในการ ตอบสนองเพียง 5 วินาที สุดท้ายนาวิธีนี้ ไปประยุกต์ใช้สาหรับวิเคราะห์หาปริมาณไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ในตัวอย่างจริง ผลการทดลองพบว่าผลวิเคราะห์ที่ได้เมื่อเปรียบเทียบกับฉลากผลิตภัณฑ์ไม่มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ ที่ระดับความ เชื่อมั่น 95 %           In this research, a biosensor was developed for detection of hydrogen peroxide. Horseradish peroxidase was immobilized on electrode surface via polypyrole and gold nanoparticles. All affecting performances of biosensor were optimized such as electropolymerization time of polypyrole, concentration of pyrole, volume of gold nanoparticles, applied potential, concentration and pH of phosphate buffer. The optimum conditions were: 40 second for electropolymerization time, 0.1 M of pyrole concentration, 500 μL of gold nanoparticles, -0.15 V for applied potential, 0.1 M and pH 6.00 of phosphate buffer. This developed biosensor could detect the concentration of hydrogen peroxide in the range of 0.1-0.9 mM with the detection limit at 0.02 mM which was estimated as the analyte concentration that produced a signal of three times the background noise. The response time was only five second. Finally, the proposed method was applied to detect the concentration of hydrogen peroxide in real samples. When compared with the label, it was found that all results were no difference at significance level of 95 %.