จุลกายวิภาคและเคมีจุลกายวิภาคโดยการใช้ lectin ในการเจริญของเซลล์สืบพันธุ์ เพศเมียในม้าน้ำดำ (Hippocampus kuda)

Abstract

การวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาจุลกายวิภาคและเคมีของการพัฒนาของเซลล์สืบพันธุ์เพศเมียของม้าน ้าด า (Hippocampus kuda) โดยกรรมวิธีพาราฟิ น เก็บตัวอย่างรังไข่จากตัวสัตว์และรักษาสภาพด้วยสารละลายบูแอง นำตัวอย่าง ที่ฝังในฟาราฟินไปตัดที่มีความหนา 7 ไมครอน และทำการย้อมด้วยสีฮีมาทอกไซลีนและอีโอซีน (H-E) สีเพอริโอดิซ ชิฟ และ ฮีมาทอกไซลีน (PAS/H) สีอัลเชียน บลู pH2.5 (AB pH2.5) เซลล์ภายในรังไข่ม้าน ้าแยกเป็ นระยะต่าง ๆ ดังนี้ ระยะ oogonia ระยะ primary growth ระยะ oil droplet ระยะ cortical alveolus ระยะ vitellogenic และระยะ maturation โอโอไซต์มีขนาด ประมาณ 10 ไมครอนถึง 675 ไมครอน ในการศึกษาการกระจายของไกลโคคอนจูเกตด้วยเลคติน (lectin) ระหว่างการพัฒนา ของโอโอไซต์เมื่อเริ่มต้นระยะ cortical alveolus พบว่า cortical alveoli กระจายใกล้บริเวณด้านนอกของไซโทพลาสซึม และ cortical alveoli บรรจุสารพวกไกลโคคอนจุเกตที่เป็ นกลางและเป็ นกรด โดยเฉพาะน ้าตาล α/β-acetyl-D-galactosamine, α-acetyl-D glucosamine, α-mannose และ sialic acidชั ้น zona radiata ย้อมติดเลคตินทุกชนิด แสดงว่าผิวของโอโอไซต์ มีองค์ประกอบของโพลีแซคคาไรด์ที่ซับซ้อนThe present research aimed to study on feature histological andhistochemical of the female germ cells In the seahorse (Hippocampus kuda) during development stages by using paraffin methods. The ovarian samples were taken from animal bodies and fixed in Bouin’s solution. The paraffin embed samples were sectioned at 7 µm-thickness which were stained with Hematoxylin and Eosin (H-E), Periodic-acid Schiff and hematoxylin (PAS/H), alcian blue pH2.5 (AB pH2.5) and lectin. The ovarian cells in seahorse ovary were characterized into various stages (including oogonia, primary growth, oil droplet, cortical alveolus, vitellogenic and maturation). Those of the observed oocytes showed a wide range of diameters 10 m to 675 m. Lectin histochemistry was also applied to distribution of glycoconjugates during the initiation of cortical alveolus stage, an appearance of cortical alveoli alveoli containingneutral and carboxylated glycoconjugates was obviously seen around the peripheral area of cytoplasm. Both of glycoconjugates within cortical alveoli were specially composed of α/β-acetyl-D-galactosamine, α-acetyl-D glucosamine, α-mannose and sialic acid. The zona radiata positively reacted to all lectins, which indicatedthecomplex polysaccharides in the surface of oocytes.