การคัดแยกและศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการผลิตพอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอตจากเชื้อบาซิลลัส

Abstract

          พอลิไฮดรอกซีอัลคาโนเอต (PHA) ถูกผลิตและสะสมในไซโทพลาซึมของแบคทีเรียหลายชนิดเพื่อใช้เป็นแหล่งคาร์บอนและพลังงาน งานวิจัยนี้มีจุดประสงค์เพื่อคัดเลือกแบคทีเรียบาซิลลัสที่สามารถผลิตสาร PHA ได้สูงพร้อมทั้งศึกษาสภาวะที่เหมาะสมในการผลิต PHA ผลการทดลองพบว่าจากเชื้อบาซิลลัส จำนวน 200 ไอโซเลท เชื้อไอโซเลท Bt109-16 สามารถผลิต PHA ได้สูงสุดที่ 0.45 กรัมต่อลิตร (ร้อยละ 34.31 โดยน้ำหนักเซลล์แห้ง) และหลังจากการปรับองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อและสภาวะการเลี้ยงพบว่าเชื้อไอโซเลท Bt109-16 สามารถผลิต PHA ได้สูงสุดที่ 1.86 กรัมต่อลิตร (ร้อยละ 50.86 โดยน้ำหนักเซลล์แห้ง) เมื่อเลี้ยงในอาหาร nitrogen deficient ที่ประกอบด้วยน้ำตาลซูโครส ความเข้มข้นร้อยละ 2 ทริปโตนความเข้มข้นร้อยละ 0.3 พีเอช 7.0 บ่มที่ 37 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 72 ชั่วโมง และจากการจัดจำแนกชนิดของแบคทีเรียโดยการวิเคราะห์ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน 16S rRNA พบว่าไอโซเลท Bt109-16 คือ Bacillus thuringiensis           Polyhydroxyalkanoates (PHA) are produced and accumulated as granules in cytoplasm of various bacteria for carbon and energy storages. This work aimed to screen the high PHA-producing Bacillus bacteria and optimize culture conditions for PHA production. The results revealed that among 200 bacterial isolates, Bt109-16 is the most efficient PHA producing bacterium (0.45 g/L, 34.31% of dry cell weight (DCW)). The maximum PHA production of 1.86 g/L (50.86% DCW) was achieved when culturing the Bt109-16 in the optimized medium containing 2% (w/v) sucrose, 0.3% (w/v) tryptone, pH 7.0 and cultured at 37°C for 72 h. Identification using 16S rRNA gene sequencing revealed that the Bt109-16 was Bacillus thuringiensis.