ผลของความแตกต่างของสารควบคุมการเจริญเติบโตพืช ต่อการเพาะเลี้ยงเปราะหูกระต่ายในหลอดทดลอง
Effect of Different Concentration of Plant Growth Regulators on in Vitro Culture of Kaempferia sisaketensis Picheans. & Koonterm
Keywords:
การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช, การย้ายปลูก, เปราะหูกระต่าย, พืชถิ่นเดียว, พืชหายาก, plant tissue culture, transplantation, Kaempferia sisaketensis Picheans. & Koonterm, endemic plant, rare plantAbstract
วัตถุประสงค์และที่มา : งานวิจัยนี้ศึกษาวิธีการขยายพันธุ์เปราะหูกระต่าย (Kaempferia sisaketensis Picheans. & Koonterm) ซึ่งมีสถานภาพเป็นพืชหายาก พืชถิ่นเดียวที่พบในภาคตะวันออกเฉียงเหนือของประเทศไทยด้วยเทคนิคการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืช วิธีการดำเนินการวิจัย : นำต้นอ่อนเปราะหูกระต่ายขนาด 1 เซนติเมตร มาเพาะเลี้ยงบนอาหารสังเคราะห์สูตร Murashige และ Skoog (MS) ที่เติมไซโทไคนิน (BA, kinetin และ TDZ) และออกซิน (NAA) ที่ระดับความเข้มข้นแตกต่างกัน เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 8 สัปดาห์ ย้ายต้นอ่อนเปราะหูกระต่ายออกปลูกในเรือนเพาะชำ โดยใช้วัสดุปลูกที่แตกต่างกัน ได้แก่ ดินร่วน ดินทราย และตินร่วนผสมดินทราย เป็นเวลา 8 สัปดาห์ ผลการวิจัย : ต้นอ่อนเปราะหูกระต่ายที่เพาะเลี้ยงในอาหารสูตร MS ที่เติม kinetin ความเข้มข้น 1 มิลลิกรัม/ลิตร มีจำนวนยอดเฉลี่ยมากที่สุด 5.30 ยอด/ชิ้นส่วนพืช เมื่อเพาะเลี้ยงต้นอ่อนเปราะหูกระต่ายในอาหารสูตร MS ที่เติม kinetin ความเข้มข้น 2 มิลลิกรัม/ลิตร ร่วมกับ NAA ความเข้มข้น 1 มิลลิกรัม/ลิตร สามารถชักนำให้เกิดรากเฉลี่ยมากที่สุด 14.50 ราก/ชิ้นส่วนพืช ต้นอ่อนเปราะหูกระต่ายที่สมบูรณ์เมื่อย้ายออกปลูกในเรือนเพาะชำในวัสดุปลูกที่แตกต่างกัน เป็นเวลา 8 สัปดาห์ พบว่าเมื่อย้ายปลูกในดินทรายมีอัตราการรอดชีวิตสูงสุด 100% สรุปผลการวิจัย : การวิจัยนี้เป็นรายงานการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อเปราะหูกระต่ายเป็นครั้งแรก จากการศึกษานี้สามารถใช้ในการขยายพันธุ์และอนุรักษ์พันธุ์เปราะหูกระต่ายไม่ให้สูญพันธุ์ Background and Objectives: This research studied a propagation protocol of Kaempferia sisaketensis Picheans. & Koonterm which is a rare and endemic plant of The Northeast of Thailand using plant tissue culture techniques. Methodology: Microshoot (1 cm long) of K. sisaketensis were cultured on Murashige and Skoog medium (MS) supplemented with various concentrations of cytokinins (BA, kinetin, and TDZ) and auxin (NAA) for eight weeks. Transferring complete plantlets of K. sisaketensis to pots containing soil, sand and soil: sand (1:1) under greenhouse conditions for eight weeks. Main Results: The results show that culturing the microshoot of K. sisaketensis on MS medium supplemented with 1 mg/l kinetin produced the highest number of shoots, which is 5.30 shoots/explant. For root induction, the results show that the highest number of roots were 14.50 roots/explant when microshoots of K. sisaketensis was cultured on MS medium augmented with 2 mg/l kinetin and 1 mg/l NAA. After transferring complete plantlets of K. sisaketensis to pots containing different types of planting materials under greenhouse conditions for eight weeks, the best survival rate was 100% when transplanting to sand. Conclusions: This research is the first report on tissue culture of K. sisaketensis. This study can be used to propagate and preserve K. sisaketensis from extinction.References
Baradwaj, R. G., Rao, M. V. & Senthil, K. T. (2017). Curbing actinomycetes and thidiazuron enhanced micropropagation in the rare Alpinia galanga–a medicinal Zingiber. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 10(7), 1-6.
Bhatt, A., Kean, O. B. & Keng, C. L. (2012). Sucrose, benzylaminopurine and photoperiod effects on in vitro culture of Kaempferia galanga Linn. Plant Biosystems, 146(4), 900-905.
Bhattacharya, M. & Sen, A. (2013). In vitro regeneration of pathogen free Kaempferia galanga L. - a rare medicinal plant. Research in Plant Biology, 3(3), 24-30.
Boonma, T., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2020). Two new species of Kaempferia L. (Zingiberaceae) from Thailand. Taiwania, 65(3), 371-381.
Fuadi, M., Mohamed, M. T. M., Salleh, N. S., Anwar, M. P., Awang, Y. & Fauzi, R. M. (2014). Effect of different concentrations of benzyladenine and frequency of watering on growth and quality of Dracaena sanderiana and Codiaeum variegatum. Journal of Environmental Biology, 35(6), 1047-1052.
George, E. F., Hall, M. A. & De Klerk, G. J. (2008). Plant Propagation by Tissue Culture 3rd Edition. Netherland: The Background Springer.
Haque, S. M. & Ghosh, B. (2018). Micropropagation of Kaempferia angustifolia Roscoe - an aromatic, essential oil yielding, underutilized medicinal plant of Zingiberaceae family. Journal of Crop Science & Biotechnology, 21(2), 147-153.
Huetteman, C. A. & Preece, J. E. (1993). Thidiazuron: a potent cytokinin for woody plant tissue culture. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 33, 105-119.
Ibemhal, A., Laishram, J., Dhananjoy, C., Naorem, B. & Toijam, R. (2012). In vitro induction of multiple shoot & root from the rhizome of Kaempferia galanga L. NeBIO-An International Journal of Environment & Biodiversity, 3(3), 46-50.
Jenjittikul, T. & Ruchisansakun, S. (2020). Kaempferia albiflora (Zingiberaceae), a new species from Thailand. Kew Bulletin, 75(1), 1-5.
Kamoltham, M., Phumkonsan, S. & Chanapan, S. (2016). Tissue culture of herbal plant, Kaempferia parviflora Wallich. ex Baker. Songklanakarin Journal of Plant Science, 3, 74-78. (in Thai)
Kanchanapoom, K. (1999). Plant Tissue Culture. Bangkok: Chulalongkorn University Press. (in Thai)
Kochuthressia, K. P., Britto, S. J., Jaseentha, M. O. & Raphael, R. (2012). In vitro antimicrobial evaluation of Kaempferia galanga L. rhizome extract. American Journal Biotechnology Molecular Sciences, 2(1), 1-5.
Labrooy, C., Abdullah, T. L. & Stanslas, J. (2020). Influence of N6-benzyladenine and sucrose on in vitro direct regeneration and microrhizome induction of Kaempferia parviflora Wall. ex Baker, an important ethnomedicinal herb of Asia. Tropical Life Sciences Research, 31(1), 123-139.
Laipaitong, K., Te-chato, S. & Khawniam, T. (2018). Plant regeneration of black galingale derived from shoot culture. Songklanakarin Journal of Plant Science, 5(1), 13-18. (in Thai)
Lu, C. Y. (1993). The use of thidiazuron in tissue culture. In Vitro Cellular & Developmental Biology-Plant, 29(1), 92-96.
Mohammad, M. K., Mohd, Z., Nik, N. N., & Nashriyah, M. A. T. (2017). Effects of Naphthalene acetic acid (NAA) on the plant growth and sugars effects on the cut flowers Mokara Chark Kuan orchid. BioScience Journal, 33(1), 19-30.
Mohanty, S., Parida, R., Singh, S., Joshi, R., Subudhi, E. & Nayak, S. (2011). Biochemical & molecular profiling of micropropagated & conventionally grown Kaempferia galanga. Plant Cell, Tissue & Organ Culture, 106(1), 39-46.
Mok, D. W. & Mok, M. C. (1994). Cytokinin Schemistry, Activity, and Function. Florida: CRC Press.
Mok, M., Mok, D., Turner, J. & Mujer, C. (1987). Biological and biochemical effects of cytokinin-active phenylurea derivatives in tissue culture systems. HortScience, 22(6): 1194-1197.
Murashige, T. & Skoog, F. (1962). A revised medium for rapid growth and bio-assay with tobacco tissue culture. Physiologia Plantarum, 15, 473-497.
Nonthalee, S., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2017). In vitro propagation of Globba annamensis Gagnep. for conservation of rare plant species in Thailand. KKU Science Journal, 45(4), 858-872. (in Thai)
Nonthalee, S., Maneechai, S., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2022). In vitro propagation, microrhizome induction, and evaluation of genetic variation by RAPD markers of Kaempferia siamensis Sirirugsa. Propagation of Ornamental Plants, 22(1), 11-13.
Parida, R., Mohanty, S., Kuanar, A. & Nayak, S. (2010). Rapid multiplication & in vitro production of leaf biomass in Kaempferia galanga through tissue culture. Electronic Journal of Biotechnology, 13(4), 1-8.
Parida, R., Mohanty, S. & Nayak, S. (2018). In vitro plant regeneration potential of genetically stable Globba marantina L., Zingiberaceous species and its conservation. Proceedings of the National Academy of Sciences, India Section B: Biological Sciences, 88(1), 321-327.
Park, H. Y., Kim, K. S., Ak, G., Zengin, G., Cziáky, Z., Jekő, J., Adaikalam, K., Song, K., Kim, D.M. & Sivanesan, I. (2021). Establishment of a rapid micropropagation system for Kaempferia parviflora Wall. ex Baker: Phytochemical analysis of leaf extracts and evaluation of biological activities. Plants, 10(4), 1-24.
Phukabhin, B., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2016). Tissue culture of Curcuma pierreana Gagnep. for conservation of rare plant in Thailand. KKU Science Journal, 44(2), 294-306. (in Thai)
Picheansoonthon, C. & Koonterm, S. (2009). A new species of Kaempferia L. (Zingiberaceae) from Northeastern Thailand. Taiwania, 54(1), 52-56.
Preetha, T., Hemanthakumar, A. & Krishnan, P. (2013). Shoot tip cryopreservation by vitrification in Kaempferia galanga L. an endangered, overexploited medicinal plant in tropical asia. IOSR Journal of Pharmacy & Biological Science, 8(3), 19-23.
Promthep, K., Sanpote, P. & Kamol, P. (2012). A taxonomic survey of Zingiberaceae species in Huai Kha Khaeng wildlife sanctuary, Uthai Thani Province. Naresuan Phayao Journal, 5(1), 1-7. (in Thai)
Pudphong, J., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2015). In vitro propagation of Kaempferia larsenii Sirirugsa for conservation of rare plant species in Thailand. KKU Science Journal, 43(4), 673-687. (in Thai)
Reena, P., Sujata, M. & Sanghamitra, N. (2015). Rapid and stable propagation of Globba marantina L., an important medicinal plant of family Zingiberaceae. In Annual International Conference on Advances in Biotechnology. (pp 2251-2489). India: Singapore.
Saensouk, P., Muangsan, N., Saensouk, S. & Sirinajun, P. (2016). In vitro propagation of Kaempferia marginata Carey ex Roscoe, a native plant species to Thailand. Journal of Animal & Plant Sciences, 26(5), 1405-1410.
Saensouk, S. (2011). Endemic and rare plant of ginger family in Thailand. KKU Research Journal, 16(1), 306-330. (in Thai)
Sahoo, S., Parida, R., Singh, S., Padhy, R. N. & Nayak, S. (2014). Evaluation of yield, quality & antioxidant activity of essential oil of in vitro propagated Kaempferia galanga Linn. Journal of Acute Disease, 3(2), 124-130.
Saliwan, S., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2022). In vitro propagation of Kaempferia koratensis Picheans., an endemic plant of Thailand. Koch Cha Sarn Journal of Science, 44(1), 1-13. (in Thai)
Shirin, F., Kumar, S. & Mishra, Y. (2000). In vitro plantlet production system for Kaempferia galanga, a rare Indian medicinal herb. Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 63, 193-197.
Suvandech, K. & Sookchaloem, D. (2007) Systematic studies of Zingiberaceae in Thong Pha Phum forest, Kanchanaburi Province. In BRT Research Reports 2007. (pp197-208). Thailand: National Center for Genetic Engineering and Biotechnology. (in Thai)
Yaowachai, W., Saensouk, S. & Saensouk, P. (2020). In vitro propagation and determination of total phenolic compounds, flavonoid contents and antioxidative activity of Globba globulifera Gagnep. Pharmacognosy Journal, 12(6), 1740-1747.
Zhang, S., Liu, N., Sheng, A., Ma, G. & Wu, G. (2011). Direct and callus-mediated regeneration of Curcuma soloensis Valeton (Zingiberaceae) and ex vitro performance of regenerated plants. Scientia Horticulturae, 130(4), 899-905.
