การศึกษาผลของสารสกัดจากสมุนไพรต่อเยื่อหุ้มเซลล์ของแบคทีเรียสายพันธุ์ดื้อยาโดยวิธี Flow cytometry
Study on the effect of medicinal plant extracts on cytoplasmic membrane of multidrug resistance bacteria by flow cytometry
Keywords:
flow cytometry, A. baumannii, MRSA, จันทน์แดง, จันทน์เทศ, จันทน์ชะมดAbstract
การศึกษาครั้งนี้ทำการทดสอบฤทธิ์ของสารสกัดสมุนไพรจันทน์แดง จันทน์เทศ และจันทน์ชะมดต่อเยื่อหุ้มเซลล์ของแบคทีเรียดื้อยาทั้ง 2 สายพันธุ์ คือ Acinetobacter baumannii และ Methicillin resistant Staphylococcus aureus โดยวิธี Flow cytometry การทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าสมุนไพรช่วยทำให้ ethidium bromide ผ่านเข้าเซลล์ของแบคทีเรียดื้อยาได้ดีขี้น โดยใช้ ethidium bromide ซึ่งเป็นสีย้อมเรืองแสงเข้าไปจับกับกรดนิวคลิอิกของแบคทีเรียแล้วทำให้เกิดการเรืองแสง จึงสามารถติดตามการผ่านเข้าออกของสมุนไพรในเซลล์แบคทีเรียดื้อยาด้วย FACscan flow cytometry จากการทดลองพบว่าสารสกัดสมุนไพรทั้งสามชนิดที่นำมาศึกษาสามารถพบว่าสารสกัดจันทน์แดง จันทน์เทศ และจันทน์ชะมด ที่ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ มีฤทธิ์ทำให้ ethidium bromide ผ่านเข้าเซลล์ของแบคทีเรียดื้อยาทั้งสองสายพันธุ์ได้ดีขึ้นเมื่อเติมสมุนไพรที่ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ ค่าความเข้มข้นที่ต่ำที่สุดของจันทน์แดงและจันทน์เทศ และจันทน์ชะมดที่สามารถนำพา ethidium bromide เข้าเซลล์ของ A. baumannii สายพันธุ์ดื้อยาคือ น้อยกว่าหรือเท่ากับ 0.01, 0.01 มก./มล. ตามลำดับ นอกจากนี้สารสกัดจันทน์แดงและจันทน์เทศที่ระดับต่ำที่สุดที่สามารถช่วยนำพา Ethidium bromide เข้าเซลล์ MRSA คือ 0.05 มก./มล. เท่ากันตามลำดับ The Dracaena loureiri Gapnep., Myristica fragrans Houtt. And Mansonia gagei Drumm. Were investigated for their abilities to enhance bacterial permeability of resistant bacteria including Acinetobacter baumannii and Methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) by flow cytometry. This experiment exhibited enhancement of medicinal plant extracts to disrupt the cytoplasmic membrane of living bacterial cells. The membrane – impermeant nucleic acid stain of ethidium bromide of A. baumannii and MRSA were tested by FACscan flow cytometry. The varied concentration of medicinal plant extracts were tested theirs ability to enhance permeability of multidrug resistant bacteria. The results indicated that herb extracts could promote intracellular accumulation of ethidium bromide in both strains of multidrug resistant bacteria. In the treatment of crude extracts to A. baumannii the lowest concentration of D. loureiroi Gapnep., M. fragrans Houtt. And M. gagei Drumm. That showed the brighter signal and uniformly fluorescent were ≤ 0.01, 0.01 and mg/ml, respectively. Also, the treatment with 0.05 mg/ml of both D. loureiroi Gapnep. and M. fragrans Houtt. enhance bacterial permeability of ethidium bromide into MRSA.References
สุรางค์ นุชประยูร, จินตนา จิรถาวร และณัฏฐิยา หิรัญกาญจน์. (2546). เวชศาสตร์โมเลกุล. กรุงเทพฯ: เท็กแอนด์เจอร์นัล.
Brehm, S.B.F., & Johnson, E.A. (2003). Sensitization of Staphylocccous aureus and Escherichia Coli to Antibiotics by the Sesquiterpenoids Nerolidol, Farnesol, Bisabolol and Apritone. Antimicrobial Agents and Chemothera, 47(10), 3357-3360.
Chung, J.Y., Choo, J.H. Lee, M.H., & Wang, K. (2006). Anticariogenic activity of macelignan Isolated from Myristica fragrans (nutmeg) against Streptococcus mutans. Phytomedicine, 13(4), 261-266.
Fukai, T., Kiyoshi, K., & Terada, S. (2005). Antimicrebial activity of 2-arylbenaofurans from Morus species against methicillin-resistant Staphylococcus aureus. Fitoterapia, 76,708-711.
Fulnecky, E.J., Wright, D., Scheld, W.M., Kanawati, L., & Shoham, S. (2005). Amikacin and colistin for treatment of Acinetobacter baumannii meningitis. Journal of Infection, 51, 249-251.
Gebhardt, R. (2003). Antioxidative, antiproliferative and biochemical effects in HepG2 cells of a homeopathic remedy and its constituent plant tinctures tested separately or in combination. Arzneimittel-Forschung, 53(12), 823-830.
Jim, S., (2006). Cell Model Bacterial cell structure. Retrieved February 15, 2007, from http://www.cellsalive.com/cells/bactcell.
Jorio, H., Tran, R., Meghrous, J., Bourget, L., & Kamen, A. (2005). Analysis of baculovirus aggregates using flow cytometry. Journal of Virological Methods, 134, 8-14.
Likhitwitayawuid, K., Sawasdee, K., & Kirtikara, K. (2002). Flavonoids and stillbenoids withCOX-1 and COX-2 inhibitory activity from Dracaena loureiri. Planta medica, 68(9), 841-843.
Mutoh, T., Adachi, O., Tsuji, K., Okunaka, M., & Sakagami, M. (2007). Efficacy of Mastoidectomy on MRSA-infected chronic otitis media with tympanic membrane Perforation. Auris, nasus, larynx, 34(1), 9-13.
