การประยุกต์ใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดี ในการจำแนก Vibrio harveyi ชนิดที่ก่อโรครุนแรงจากระบบการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ

Application of Monoclonal Antibody for Identification of Virulent Vibrio harveyi in Aquaculture

Abstract

จากการรวบรวม Vibrio harveyi จากแหล่งต่าง ๆ 8 สายพันธุ์ Vibrio spp. สายพันธุ์ต่าง ๆ ที่ทราบชนิด Vibrio spp. เก็บจากอวัยวะของสัตว์น้ำ เช่น ตับกุ้ง ทางเดินอาหารของหอย เพรียงทราย และอาร์ทีเมีย ที่เจริญบนอาหาร TCBS และแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ มาทดสอบกับโมโนโคลนอลแอนติบอดี VH26-11E ซึ่งจำเพาะต่อ V. harveyi สายพันธุ์ที่ก่อโรครุนแรง (V. harveyi 1526) โดยวิธี Dot Blotting และ Western Blotting พบว่าแบคทีเรียอื่น ๆ Vibrio spp. ทุกชนิดและ V. harveyi 6 สายพันธุ์ให้ผลลบ มีเพียงสายพันธุ์เดียวจากสุราษฎร์ธานีที่แยกจากกุ้งกุลาดำที่เป็นโรคเท่านั้น ที่สามารถทำปฏิกิริยากับโมโนโคลนอลแอนติบอดีนี้ได้เช่นเดียวกับ V. harveyi 1526 ซึ่งจากการทดสอบปฏิกิริยาทางชีวเคมีพบว่า V. harveyi ทั้ง 2 สายพันธุ์ มีลักษณะคล้ายกัน แต่บางลักษณะแตกต่างจาก V. harveyi สายพันธุ์อื่นที่ร่วมทดสอบ แสดงว่าโมโนโคลนอลแอนติบอดี VH26-11E ทำปฏิกิริยา V. harveyi ชนิดก่อโรครุนแรงและมี cross reactivity กับ V. harveyi จากสุราษฎร์ธานี ดังนั้นโมโนโคลนอลแอนติบอดีนี้สามารถจำแนก V. harveyi ที่ก่อโรคในสัตว์น้ำได้ และคาดว่าจะนำมาใช้ตรวจสอบเพื่อควบคุมการระบาดของโรคในการเพาะสัตว์น้ำได้อย่างมีประสิทธิภาพ  Eight strains of Vibrio harveyi, Vibrio spp. from different sources, Vibrio spp. grown on TCBS agar and isolated from shrimp hepatopancreas, digestive system of mollusks, polycheate and brine shrimp and non-Vibrio species, were tested with monoclonal antibody (MAb). MAb VH26-11E specific to virulent strain of V. harveyi by dot blotting and Western blotting were used for Vibrio spp. studying. and six species of V. harveyi were negative, except that only the type of V. harveyi being isolated from P. monodon at Surattani province reacted with the MAb as same as V. harveyi 1526. The result of biochemical technique test for confirmation revealed that both species of V. harveyi were similar, but some kinds of their characteristics were different from the others being tested. This indicates that VH26-11E can act with virulent V. harveyi and generate cross reactivity with V. harveyi of Surattani sample. Hence, MAb can be used to differentiate virulent V. harveyi from non-virulent isolates. Besides, it is expected to monitor the outbreak of bacterial infection in aquaculture system.